血清小知識血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，而且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞的起到某些保護作用。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出...

檢測某一個基因的表達產物或者要比較表達產物量的相對變化，方法是westernblot。而WesternBlot試驗中比較這些的前提條件是等量的細胞上樣，這樣才有比較的基礎。而人為的操作會產生一定的誤差，這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參來校正。因此選擇一個合適的內參抗體來校正上樣誤差是非常重要的。所以嚴謹的WesternBlot實驗設計中需要有良好的參照體系，后續的實驗結果分析才具有說服性。在WesternBloting實驗中，可能內參即是內部參照(Intern...

激動劑抑制劑可抑制腸神經系統釋放ACh,減緩胃腸道動力.在健康人，哌波色羅能對抗西沙必利對結腸的促動力作用，延緩結腸傳輸，但不改變結腸的感覺和順應性；拮抗外源性.5-HT所致的腸道蠕動反射。在腹瀉型IBS患者中，哌波色羅可以延長口-盲傳輸，使結腸蠕動減弱，降低直腸敏感性，從而改善患者的癥狀。激動劑抑制劑可升高觸發小腸蠕動的壓力感受閾值和降低小腸壁的順應性。Meuse等發現在脊髓背角淺層初級傳入神經末梢有5-HT7受體的表達，參與大鼠傷害性感受器的激活。目前尚無5-HT7受體制...

細胞因子還廣泛效果于神經,內分泌系統,對細胞間相互效果、細胞的增殖分解和效應功用有重要的調節效果.細胞因子發揮廣泛多樣的生物學功用是經過與靶細胞膜外表的受體相結合并將信號傳遞到細胞內部.因此,了解細胞因子受體的結構和功用關于深入研究細胞因子的生物學功用是*的.跟著對細胞因子受體的深入研究，發現了細胞因子受體不同亞單位中有同享鏈現象，這對說明很多細胞因子生物學活性的相似性和差異性從受體水平上提供了根據。絕大多數細胞因子受體存在著可溶性方式，把握可溶性細胞因子受體發生的規則及其生...

在westernBlot過程中，蛋白Marker雖然是其中小小的一環，但是這個小細節對實驗結果的影響不可忽視。Marker在蛋白電泳中的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，只有標準量無誤，實驗結果才有說服力。此外，Marker還能顯示轉膜是否成功以及蛋白在凝膠上的電泳程度的作用。因此選擇正確的蛋白Marker也是westernblot實驗成功的必要條件之一?？傮w來說，蛋白分子量標準可以分成未染蛋白分子量標準、預染蛋白分子量標準二個級別。未染色的蛋白分子量標準未染色的...

淋巴細胞分離液取新鮮抗凝血1ml，與生理鹽水1:1混勻后，小心加于2ml細胞分離液之液面上；以400g（約1500轉/分，半徑15cm水平轉子）離心20分鐘，此時離心管中由上至下細胞分四層。*層：為血漿層。第二層：為環狀乳白色淋巴細胞層。第三層：為透明分離液層。第四層：為紅細胞層。收集第二層細胞放入含生理鹽水4-5ml的試管中，充分混勻后，以400g（約1500轉/分）離心20分鐘。沉淀經2次洗滌后即得所需淋巴細胞。淋巴細胞分離液方法，取肝素抗凝血1ml加Hanks液1m1稀...

Westernblotting是一個步驟繁多的實驗，每一步都會對zui后的結果產生影響，電泳過程是其中關鍵重要的一步。好的電泳能讓目的條帶整齊，結果圖讓人眼前一亮。要做好電泳也并非易事，凝膠質量在其中扮演著重要作用。電泳的支持介質為聚丙烯酰胺凝膠，該凝膠的聚合由丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺單體在自由基的催化下完成。常用的催化聚合方法有兩種，分別為化學聚合法和光聚合法，實驗室配制凝膠通常為化學聚合。在聚合過程中，TEMED催化過硫酸銨產生自由基引發丙烯酰胺單體聚合，同時甲叉雙丙烯酰...

預染marker易于使用–與上樣緩沖液預先混合，可直接凝膠上樣，無需煮沸。條帶清晰–亮度類似，但顏色不同的條帶便于觀察。質量檢測–每批次均經過SDS-PAGE和Westernblotting驗證。兩個參考條帶–70kDa為橙色，10kDa為綠色。與膜兼容–Westernblotting時彩色條帶將轉移到膜上應用，監測SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳期間蛋白的遷移。監測Westernblotting蛋白轉移到膜上的情況。測定SDS聚丙烯酰胺凝膠和Westernblots上的蛋白分子量。...