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                • 絲裂原活化蛋白激酶MAPK(mitogen-activatedproteinkinase)是信號從細胞表面傳導到細胞核內部的重要傳遞者,其調節轉錄因子和相關酶的活性,參與細胞增殖、分化、轉化及凋亡的調節,并與炎癥、腫瘤等多種疾病的發生密切相關。MAPK是一組能被不同的細胞外刺激,如細胞因子、神經遞質、激素、細胞應激及細胞黏附等激活的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶。該通路的基本組成是一種從酵母到人類都保守的三級激酶模式,包括MAPK激酶激酶(MAPkinasekinasekinase,...

                  2017-09-21
                • 1.如何保存和分裝抗體?對于許多抗體而言,分裝為小等份在-20℃或-80℃下凍存是*的保存條件。抗體保存應避免反復凍融,分裝可以zui大限度減少凍融對抗體造成的損壞,還可避免多次從同一管中移取抗體而引入污染。但是每份不應該少于10uL。分裝的體積越小,抗體的濃度受蒸發和管壁吸附的影響就會越大。大部分情況下,抗體在4℃條件下能夠保存1-2周。但有部分特例。為了防止微生物污染,可在抗體中加入適當濃度的NaN3。如果要用抗體對活細胞進行染色或處理,或者要用抗體進行體內研究,則不能使...

                  2017-09-05
                • BSA試劑重金屬(如Pb):BSA試劑的基本信息,貨號:A8020規格:10g100g500g1000g別名:牛血清白蛋白(第五部分);牛白朊(第五部分);牛白蛋白;蛋白粉;BSAV;Albumin(bovinefractionV;BovinealbuminfractionⅤ;BovineserumalbuminfractionⅤ分子量:68Kd。外觀:類白色凍干粉。特性:純度(蛋白質):≥95%,水≤5%;均一化電泳檢測。雜質:Na:BSA試劑可提高特異性的識別能力。在做w...

                  2017-07-05
                • WB常用試劑使用可逆染色劑例如麗春紅S檢測轉膜效果,檢查轉膜操作是否正確。PVDF膜需預先浸在甲醇中,然后浸到轉移緩沖液中。代替5%脫脂奶粉,使用含0.5%脫脂奶粉或無脫脂奶粉的抗體稀釋液,或更換封閉劑,減少封閉時間。使用新鮮一抗,重復使用有效濃度會降低。在孵育和洗滌液中加入溫和去污劑如吐溫-20。脫脂奶粉含有酪蛋白,該蛋白本身就是一種磷酸化蛋白,會結合磷酸化特異性抗體而易產生高背景。使用BSA代替奶粉作為封閉劑。WB常用試劑使用溫和的去污劑如吐溫-20,或更換封閉劑(常用的...

                  2017-06-06
                • 封閉的原理:固相載體表面(如elisa板,NC膜或者PVDF膜上等)有很多孔洞,通過電轉或包被,膠上的蛋白被轉移到了膜上,或抗原/抗體固定在板上,蛋白以機械填補(堆積)和吸附的方式結合于表面。蛋白塞進了表面的很多孔洞里面,但蛋白并不是連續的,有很多空隙,而且比如說樣品孔之間也有空隙,這些孔洞并沒有填進東西,而抗體也是蛋白,也會被吸附在空的洞里,這樣就會有很多非特異性的信號。封閉液中的蛋白可以與表面上的空白空洞位置結合,同樣以機械填補(堆積)和吸附覆蓋的方式結合在膜上,因為有“...

                  2017-05-31
                • 預染marker通常細胞增殖實驗每孔加3000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入6000個細胞。具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定。37℃5%CO2繼續培養或按照實驗具體需要進行培養,一般培養6~24h。按照實驗具體要求,給予0~20ml干預藥物處理,37℃5%CO2繼續培養至合適時間。預染marker分子量范圍–10種蛋白分子量范圍在10到170kDa之間。易于使用–與上樣緩沖液預先混合,可直接凝膠上樣,無需煮沸。條帶清晰–亮度類似,但顏色不同的...

                  2017-05-17
                • 蛋白酶k廣泛應用在皮革、毛皮、絲綢、醫藥、食品、釀造等方面。皮革工業的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶,既節省時間,又改善勞動衛生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用,如用胃蛋白酶治療消化不良,用酸性蛋白酶治療支氣管炎,用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對外科化膿性創口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產品,含堿性蛋白酶,能去除衣物上的血漬和蛋白污物,但使用時注意不要接觸皮膚,以免損傷皮膚表面的蛋白質,引起皮疹、濕疹等...

                  2017-05-03
                • 胎牛血清血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品質zui高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對...

                  2017-05-02
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