淋巴細胞分離液的基本理論
更新時間：2017-10-11 點擊次數(shù)：3177
淋巴細胞分離液取新鮮抗凝血1ml，與生理鹽水1:1混勻后，小心加于2ml細胞分離液之液面上；以400g（約1500轉(zhuǎn)/分，半徑15cm水平轉(zhuǎn)子）離心20分鐘，此時離心管中由上至下細胞分四層。*層：為血漿層。第二層：為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層：為透明分離液層。第四層：為紅細胞層。收集第二層細胞放入含生理鹽水4-5ml的試管中，充分混勻后，以400g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心20分鐘。沉淀經(jīng)2次洗滌后即得所需淋巴細胞。
淋巴細胞分離液方法，取肝素抗凝血1ml加Hanks液1m1稀釋后，沿管壁徐徐滴流疊加盛有2m1淋巴細胞分離液的試管內(nèi)（注意勿與分離液混合，然后2000r/min水平離心20min，醫(yī)學|教育|網(wǎng)搜集整理管內(nèi)分為4層，自上而下依次為血漿，單個核細胞，顆粒白細胞、紅細胞（圖2-1）。用毛細管伸至單個核細胞層中（位于細胞分離液與血漿的界面上），沿管壁輕輕吸出全部細胞。然后用Hanks液洗兩次，每次r/min離心10min，zui后用RPMIl640培養(yǎng)液將細胞配成2×106/m1的細胞懸液備用。
淋巴細胞分離液主要組成成份是葡聚糖（右旋糖酐）與泛影酸葡甲胺。適用于從人抗凝血液中分離單個核細胞（主要為淋巴細胞），無菌條件下所分離的細胞可用于免疫學檢測。
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