Human MMP-9 ELISA KIT

檢測原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人MMP-9抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經過孵育，樣本中存在的MMP-9與固相抗體和檢測抗體結合，形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預包被96孔板、標準品、MMP-9檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：0.156ng/mL

檢測范圍：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：85-104%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

基質金屬蛋白酶（MMPs）也被稱為matrixins，是鋅鈣依賴性蛋白水解酶家族成員，可分解細胞外基質（ECM），在不同的亞細胞環境中，參與多種分子的加工過程。MMPs在眾多生理學進程中發揮重要功能，例如胚胎發育、形態發生、繁殖以及組織重構。也參與炎癥以及自身免疫疾病，例如關節炎、癌癥和心血管疾病。新合成的MMPs的量主要在轉錄水平被調節，已經存在的MMPs的蛋白水解活性，不僅受控于酶原的活性，也受控于內源性抑制劑對酶活性的抑制，例如α2-巨球蛋白，以及金屬蛋白酶組織抑制劑（TIMPs）。

MMP-9（也稱明膠酶B、92kDa IV型膠原酶、92kDa明膠酶、V型膠原酶）作為糖基化酶原被分泌出來。酶原的活化涉及到N-末端前體區域的蛋白水解去除，終形成82kDa的活性酶。活性人MMP-9與小鼠和大鼠的MMP-9分別有72%和74%的氨基酸序列同源性。除了鋅結合位點，催化結構域還包含三個連續的纖連蛋白II型同源單位，可結合明膠。富含脯氨酸的鉸鏈區將催化結構域連接到C-末端血紅素樣結構域。在體外實驗中，酶原經4-氨基苯基乙酸乙酯（APMA）處理后，不僅能產生活性酶，還能產生活性與其相當的C-末端截短形式。MMP-9可降解ECM中的成分，尤其對變性膠原（明膠）有非常高的特異性。MMP-9也可裂解III、IV、V、XI型膠原，以及彈性蛋白、巢蛋白-1 和玻連蛋白。MMP-9還可裂解多種趨化因子和生長因子（例如IL-1β、CXCL8/IL-8、CXCL7、CXCL4、CXCL1、Latent TGF-β、膜結合TNF-α、VEGF和FGF basic），β-淀粉樣蛋白、P物質、髓鞘堿性蛋白。此動作可提高或降低這些可溶性因子的生物活性，也可使它們從與ECM的聯合中被釋放出來。MMP-9也可通過各種各樣的膜蛋白觸發信號通路，或是誘導它們從細胞膜上脫落從而抑制信號通路（例如CD44，E-鈣黏蛋白、整合素、ICAM-1和IL-2 Rα）。

MMP-9由多種正常細胞和轉化細胞產生，包括中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞、星形膠質細胞、纖維原細胞、破骨細胞、軟骨細胞、角化細胞、內皮細胞和上皮細胞。它影響生理性和病理性的血管生成和血管重構。活化的中性粒細胞釋放MMP-9前體，不結合TIMP-1，允許促血管生成的FGF-2從ECM中釋放出來。MMP-9和TIMP-1的復合物不能誘導FGF-2的釋放。中性粒細胞來源的MMP-9可加劇炎癥反應，通過產生來自膠原多肽來誘導額外的中性粒細胞MMP-9的釋放。MMP-9在骨形成和重構、誘導行為敏化與應答、神經元突觸重構的調控、著床過程中的滋養層入侵、絲氨酸蛋白酶抑制劑α1的活化中也發揮重要作用。MMP-9介導的粘附分子的脫落對于腫瘤細胞的侵襲也有直接作用。

MMP-9的循環水平在許多炎癥失調疾病中有所升高，包括管腔內血栓的形成、動脈粥樣硬化、克羅恩氏病、丙型肝炎病毒感染、結腸直腸癌以及杜氏肌營養不良。MMP-9與TIMP-1的比例在多發性硬化癥血清和囊性纖維化痰中升高，但在巨細胞病毒感染的血清中降低。游離MMP-9的水平、MMP-9與脂質運載蛋白-2/NGAL復合物的水平分別在卵巢癌患者、子宮尿道感染患者的尿液中升高。