Human VEGF ELISA Kit

檢測原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人VEGF抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的VEGF與固相抗體和檢測抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標準品、VEGF檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：7.8pg/mL

檢測范圍：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：113-135%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

血管內(nèi)皮生長因子（VEGF或VEGF-A）又叫血管通透因子，是一種針對胎兒和成人的血管新生和血管生成的有效調(diào)節(jié)因子。血管內(nèi)皮生長因子屬于PDGF家族，該家族蛋白的特點是在胱氨酸結(jié)和通過反向平行二硫鍵結(jié)合的二聚體的結(jié)構(gòu)處，存在8個保守的胱氨酸殘基。經(jīng)過選擇性剪切和氨基酸的序列長度，人類表達不同的亞型，包括：VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF183、VEGF189和VEGF206等等。其中VEGF165是表達量高的一種亞型，其次是VEGF121和VEGF189。除了VEGF121，其它的亞型都包含了基本的肝素結(jié)合區(qū)域且不能自由擴散。人類的VEGF165與小鼠和大鼠的相應(yīng)的蛋白氨基酸序列同源性為88%。VEGF在各種細胞和組織中表達，包括骨骼肌細胞和心肌細胞、肝細胞、成骨細胞、中性粒細胞、巨噬細胞、角質(zhì)形成細胞、棕色脂肪細胞、CD34+干細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、血管平滑肌細胞等等。VEGF的表達收到缺氧和細胞因子的誘導(dǎo)，包括IL-1、IL-6、IL-8、抑瘤素M和腫瘤壞死因子α等。在發(fā)育過程和成體中，VEGF的表達量也是不同的。

VEGF的二聚體與2個相關(guān)的酪氨酸激酶受體相結(jié)合，即VEGF R1（也叫Flt-1）和VEGF R2（Flk-1/KDR）。VEGF同時可以誘導(dǎo)后者的同型二聚體和自磷酸化過程。這些受體擁有7個胞外的免疫球蛋白的域和一個胞內(nèi)分開的酪氨酸受體域。血管內(nèi)皮細胞和其它一些非內(nèi)皮細胞都表達VEGF受體。盡管VEGF與VEGF R1的親和力高，但VEGF R2卻是調(diào)控VEGF的血管生成的主要因子。VEGF165也結(jié)合臂板蛋白（semaporin）受體，神經(jīng)纖毛蛋白1（neuropilin-1），由此促進與VEGF R2的復(fù)合體形成。

VEGF因其參與血管生成而著稱。在胚胎發(fā)育過程中，VEGF調(diào)控內(nèi)皮細胞的增殖、遷移和生存，并由此調(diào)控血管的密度、體積；但對于血管形成的格局并不起作用。VEGF通過成骨細胞和軟骨細胞的招募促進骨骼的形成，它同時也是一個單核細胞趨化因子。在產(chǎn)后，VEGF維持血管內(nèi)皮細胞的完整性，并且是大/小血管內(nèi)皮細胞的有效絲裂原。在成體中，VEGF主要在傷口修復(fù)和女性的生殖周期發(fā)揮作用。在疾病組織當(dāng)中，VEGF促進血管的通透性。因此，VEGF通過外滲和腫瘤血管生成參與了腫瘤的轉(zhuǎn)移過程。針對阻斷VEGF活性的各種治療策略正在被用于控制由VEGF誘導(dǎo)的腫瘤血管生成。體內(nèi)循環(huán)的VEGF水平與自身免疫性疾病（如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等）的病癥程度相關(guān)。