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                人正常胃類器官培養基

                簡要描述:人正常胃類器官培養基(Human Gastric Organoid Culture Medium),儲存/保存方法:4°C保存,有效期3個月;-20°C保存,有效期1年。

                • 產品型號:abs9736
                • 廠商性質:生產廠家
                • 更新時間:2025-02-05
                • 訪  問  量:2032

                詳細介紹

                品牌absinCAS-
                分子式-純度-
                分子量-貨號abs9736
                規格100mL;500mL供貨周期現貨
                主要用途-應用領域化工,生物產業,綜合

                使用方法:

                1、原代 
                (1)取材后的組織放在預冷的(2-8°C)組織保存液的取樣瓶中,快速轉運至潔凈實驗室進行組織處理和細胞分離,拍照并登記信息。
                (2)準備若干培養皿,加入 4℃預冷的人正常胃類器官組織原代培養緩沖液#abs9731備用。
                (3)取樣瓶消毒,將組織放入培養皿中,利用人正常胃類器官組織原代培養緩沖液清洗三次后,利用眼科剪或手shu刀將組織jian切成體積約為 1-3mm3的組織塊。
                (4)組織用人正常胃原代zuzhi消化液#abs9783消化,4℃震蕩消化15-20min,(消化過程中隨時觀察消化情況)。
                (5)取少量液體在顯微鏡下觀察,鏡下觀察到較多的單個細胞或 70um 以下的細胞簇后,加入三倍體積人正常胃類器官組織原代培養緩沖液終止消化。
                (6)使用100um孔徑的篩網進行過濾,將濾液收集后,于300g富集離心5min后移去上清,添加人正常胃類器官組織原代培養緩沖液重新重懸離心。
                (7)基質膠計算:第6步后觀察收集到的組織體積,添加25倍組織體積的基質膠#abs9495 重懸鋪板。
                (8)24孔細胞培養板為例,每孔點膠25ul組織基質膠混合物進行鋪板(4℃下操作)。
                (9)將鋪好的培養板放入37℃培養箱中10-15min成膠,添加人正常胃類器官培養基(恢復室溫)進行培養。


                2、類器官傳代培養
                (1)移液槍吸去培養基,每孔添加1-2ml 4℃類器官傳代培養緩沖液#abs9730放置2min。
                (2)移液槍輕柔吹打基質膠,收集在15ml離心管中,4℃靜置10min。(每6-8孔為一組)
                (3)a:類器官數量不足或體積較小時: 離心5min棄去上清,添加適量人正常胃類器官傳代培養緩沖液重懸移入1.5ml離心管,300g離心5min棄去液體進行第4步。
                         b:類器官數量較多或體積較大時:離心5min棄去上清,添加適量類器官傳代消化液#abs9520 消化2-3min,添加人正常胃類器官傳代培養緩沖液終止消化,離心5min棄去混合液,添加適量人正常胃類器官傳代培養緩沖液重懸移入1.5ml離心管,300g離心5min棄去液體進行第4步。
                (4)類器官收集后,添加基質膠重懸,每孔25ul基質膠鋪在24孔細胞培養板中,放置培養箱中10-15min添加500ul人正常胃類器官培養基


                3、類器官凍存
                (1)移液槍吸去培養基,每孔添加1-2ml 4℃類器官傳代培養緩沖液放置2min。
                (2)移液槍輕柔吹打基質膠,收集在15ml離心管中,4℃靜置10min。(每6-8孔為一組)
                (3)離心5min棄去上清,添加適量人正常胃類器官傳代培養緩沖液再次重懸,300g離心5min棄去液體。
                (4)添加適量類器官凍存液#abs9519,輕柔吹打重懸,以24孔細胞培養板為例:密度為2個孔凍存1管,每管體積1.4ml。
                (5)做好標記信息,進行程序降溫后,移入液氮長期保存。


                4、類器官復蘇
                (1)取10ml人正常胃類器官傳代培養緩沖液于15ml離心管中。
                (2)從液氮罐中取出凍存的類器官細胞,快速置于 37℃水浴鍋中融解。
                (3)水浴融解過程中,需輕輕搖動冷凍管,以確保凍存液在 1-2min內wan全融解。
                (4)將溶解后的類器官細胞快速轉移至15ml 離心管,使用移液管輕輕吹打6-8次,300g 離心 5min,然后除去上清液并收集類器官細胞沉淀。添加適量人正常胃類器官傳代培養緩沖液重懸移入1.5ml離心管300g離心5min。
                (5)基質膠重懸,每孔25ul基質膠鋪在24孔細胞培養板中,放置培養箱中10-15min成膠,添加500ul人正常胃類器官培養基


                儲存/保存方法:

                4°C保存,有效期3個月;-20°C保存,有效期1年。

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                郵箱:wulan@absin.cn
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