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                螢火蟲的妙用

                更新時(shí)間:2023-04-14      點(diǎn)擊次數(shù):1044

                夏夜,一切都顯得朦朧、幽暗,似乎連空氣都變得清馥馥的。在豆棚架邊、在林下水邊、在籬前的草叢里,流螢飛起來了,三三兩兩,忽前忽后,時(shí)高時(shí)低,那么輕悄、飄忽,好像一些看不見的小精靈提著綠幽幽的燈籠,飛來飛去,那美妙的形象和色彩,著實(shí)迷人-------這些描寫螢火蟲的景象是否勾起了大家對于童年夏夜的美好回憶?


                螢火蟲發(fā)光的過程,簡單來說,是螢光素(luciferin)在螢火蟲螢光素酶的催化下發(fā)生的一系列復(fù)雜化學(xué)反應(yīng),而光即是這個(gè)過程中所釋放的能量。這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之相比,人類使用的白熾燈只有約10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,其余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi)了。科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了螢火蟲生物發(fā)光的價(jià)值,將螢火蟲發(fā)光的作用原理應(yīng)用到報(bào)告基因中而被廣泛應(yīng)用到各類基因工程實(shí)驗(yàn)中。

                那么您了解什么是螢火蟲螢光素酶?什么是螢火蟲螢光素?螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒的作用原理嗎?那么跟小愛在下文中一起尋找答案吧!

                螢火蟲螢光素酶來源于螢火蟲,是一種胞內(nèi)蛋白,大小為61KDa。而螢火蟲螢光素為280KDa的小分子脂溶性物質(zhì),為螢火蟲螢光素酶的催化反應(yīng)底物。在氧氣、Mg2+和ATP參與下,螢火蟲螢光素酶與其底物——螢火蟲螢光素發(fā)生化學(xué)反應(yīng),生成氧化螢光素,并發(fā)出黃綠色光,其發(fā)光波長約為550-570nm。化學(xué)反應(yīng)式為:



                圖1 螢火蟲螢光素酶反應(yīng)化學(xué)式


                這種無須激發(fā)光激發(fā),通過酶催化底物直接發(fā)出的螢光,特異性強(qiáng),靈敏度高。在螢光素酶與底物螢光素的反應(yīng)過程中,每一個(gè)螢光素酶反應(yīng)后只產(chǎn)生一個(gè)光子,在機(jī)體內(nèi)由于受散射和吸收的影響,到達(dá)體外且能被檢測到的光子量很少,肉眼無法觀察,因此需要一種特殊的系統(tǒng)來檢測發(fā)光信號。依賴螢光素酶的化學(xué)發(fā)光特性,利用閃爍計(jì)數(shù)器可以對螢光素酶的活性定量檢測。在標(biāo)準(zhǔn)條件下,底物過量時(shí),固定時(shí)間內(nèi),螢光閃爍次數(shù)與樣品中螢光素酶的活性成正比,因此可通過記錄閃爍次數(shù)來評價(jià)螢光素酶的活性。另外,通過光自顯影法也可以對螢光素酶進(jìn)行定性檢測。通用的方法還是通過螢光測定儀(化學(xué)發(fā)光儀)測定過程中釋放的生物螢光(化學(xué)發(fā)光)。

                基于螢火蟲螢光素酶的發(fā)光作用原理,愛必信最新推出的螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(abs60342)可在哺乳動物細(xì)胞中的表達(dá)提供快速、靈敏、穩(wěn)定的檢測方法。能夠檢測10-20 mol的螢光素酶,在10-14至10-20mol的酶濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

                螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒(abs60342)

                組分

                名稱

                50T

                200T

                1000T

                A

                5×Firefly Luciferase Lysis Buffer

                5ml

                20ml

                100ml

                B

                Firefly Luciferase Assay Buffer

                5ml

                20ml

                100ml

                C

                D-Luciferin

                1mg

                4mg

                20mg



                圖2 螢火蟲螢光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒操作流程


                實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)展示:



                圖3


                產(chǎn)品優(yōu)勢:

                1、快速:細(xì)胞裂解在 10-15min內(nèi)完成。

                2、方便:試劑易于配制,樣品檢測步驟簡單。
                3、靈敏:能夠檢測10-20 mol的螢光素酶。
                4、酶的濃度線性范圍可達(dá)8個(gè)數(shù)量級。

                適用于經(jīng)典螢光素酶應(yīng)用、細(xì)胞信號通路分析、調(diào)控原件功能性研究等。


                參考文獻(xiàn)


                [1] 趙海衛(wèi), 韓佩君, 呂欣, 等. 螢光素酶報(bào)告基因在病毒學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 生物技術(shù)通訊, 2015, 26(1): 131-134.


                本次搭配產(chǎn)品推薦:

                貨號

                產(chǎn)品名稱

                規(guī)格

                abs7018

                96孔平底發(fā)光板(白底透明蓋)

                1箱

                abs7061

                96孔透明酶標(biāo)板(可拆卸,中結(jié)合力)

                1箱

                abs7063

                96孔透明酶標(biāo)板(不可拆卸,中結(jié)合力)

                1箱


                愛必信(上海)生物科技有限公司
                地址:上海市浦東新區(qū)新浩路58號申江科創(chuàng)園18棟
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