類器官原代培養(yǎng)全流程

更新時(shí)間：2022-11-17 點(diǎn)擊次數(shù)：1287

準(zhǔn)備工作

1.儀器設(shè)備

CO2 培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺、倒置顯微鏡、臺式冷凍離心機(jī)、水浴鍋、水浴搖床，醫(yī)用冰箱、-80°冰箱、移液器（一套）、眼科剪、眼科鑷。

2.試劑耗材

小腸類器官培養(yǎng)基，小腸類器官消化液，小腸組織保存液，小腸類器官緩沖液，硫酸慶大霉素，雙抗，組織固定液，基質(zhì)膠，60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿， 100μm濾篩，15ml離心管，1.5ml EP管若干，4度冰盒，眼科剪刀，眼科鑷。

操作流程

1.類器官操作流程之——樣本準(zhǔn)備

（1）將組織放入含有器官保存液的取樣瓶中，4℃從醫(yī)院/實(shí)驗(yàn)室取回。

（2）將取樣瓶消毒，組織取出放入培養(yǎng)皿樣本拍照，并登記，大小，顏色，軟硬程度，組織類型等信息。

2. 類器官操作流程之——清洗-剪碎

添加含有雙抗、慶大霉素的類器官緩沖液浸泡，用眼科鑷刮去腸道粘膜，腸絨毛等。在培養(yǎng)皿中用類器官緩沖液清洗三次（每次更換培養(yǎng)皿）后剪碎，剪成大約1mm3的組織塊。靜置2次。

3. 類器官操作流程之——消化-過濾

（1）用組織消化液在37℃進(jìn)行消化10-15min（消化過程中隨時(shí)觀察消化情況）。

（2）類器官緩沖液終止消化，用槍頭輕柔吹打可以看到液體變渾濁。

（3）使用100μm孔徑的篩網(wǎng)進(jìn)行過濾，取少量濾液在鏡下進(jìn)行觀察，可以看到明顯的隱窩狀組織結(jié)構(gòu)。

4. 類器官操作流程之—離心、加膠。

基質(zhì)膠計(jì)算：第3步后觀察收集到的組織體積，添加25倍組織體積的基質(zhì)膠。

5. 類器官操作流程之——鋪板

加500-750μl 類器官培養(yǎng)基培養(yǎng)

6.類器官操作流程之——觀察

本期推薦

類器官培養(yǎng)基試劑盒

培養(yǎng)簡單：培養(yǎng)基集成多種因子，無需添加其他因子和再優(yōu)化；

擴(kuò)增效率高：培養(yǎng)的類器官能夠快速增長；

維持穩(wěn)定傳代：維持至少3代以上擴(kuò)增，部分類器官每次傳代可實(shí)現(xiàn)10代以上擴(kuò)增；

性價(jià)效益比：按照GMP級別生產(chǎn)條件下制備，批次質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)格優(yōu)勢明顯。

貨號	品名	規(guī)格
abs9446	Organotial乳腺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒	1kit
abs9448	Organotial子宮內(nèi)膜癌類器官培養(yǎng)基試劑盒	1kit
abs9445	Organotial結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基試劑盒	1kit
abs9444	Organotial肝癌類器官培養(yǎng)基試劑盒	1kit
abs9443	Organotial肺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒	1kit
abs9449	Organotial胃癌類器官培養(yǎng)基試劑盒	1kit
abs9447	Organotial胰腺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒	1kit

基質(zhì)膠

貨號	品名	規(guī)格	周期
abs9410	即用型基質(zhì)膠	100ml	現(xiàn)貨
abs9490	基質(zhì)膠（標(biāo)準(zhǔn)型、含酚紅）	1.5ml*8	現(xiàn)貨
abs9491	基質(zhì)膠（標(biāo)準(zhǔn)型、無酚紅）	1.5ml*8	現(xiàn)貨
abs9492	基質(zhì)膠（高濃度、含酚紅）	1.5ml*8	現(xiàn)貨
abs9493	基質(zhì)膠（高濃度、無酚紅）	1.5ml*8	現(xiàn)貨
abs9494	基質(zhì)膠（低因子、含酚紅）	1.5ml*8	現(xiàn)貨
abs9495	基質(zhì)膠（低因子、無酚紅）	1.5ml*8	現(xiàn)貨
abs9496	基質(zhì)膠（IPS驗(yàn)證無酚紅）	1.5ml*4	現(xiàn)貨
abs9497	基質(zhì)膠（高濃度、低因子、含酚紅）	1.5ml*8	現(xiàn)貨
abs9498	基質(zhì)膠(高濃度，無酚紅，低生長因子)	1.5ml*8	現(xiàn)貨

Absin特色產(chǎn)品線：
WB相關(guān)：ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體；定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...

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