產品上新 | CoIP/Pull down傻傻分不清楚？

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愛必信互作系列試劑盒上新啦！CoIP和CHIP試劑盒是我們的老角色，上架以來受到各種好評！abs955文獻量飛速增長，目前單品已將近200篇，IF最高37.3！CHIP試劑盒文獻量也在快速增長中！最近終于！愛必信互作系列新增多款試劑盒！今天給小白淺淺分析一下各種試劑盒的區別。

abs955免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒

表1 愛必信互作試劑盒

DNA pull down

原理：DNA pull down是用于分析蛋白質與DNA互作的一種分析技術。通常用來分析目標基因調控區域相結合的轉錄因子及其他調控蛋白。

該技術針對目標區域設計特異性DNA探針并經過脫硫生物素標記，標記后探針可以和偶聯在磁珠上的鏈霉親和素親和結合，再與總蛋白提取物進行孵育，有互作的蛋白質可以和DNA探針特異性結合，形成磁珠-DNA探針-蛋白復合物，洗滌去除非特異性結合的蛋白質，再經過洗脫得到目的DNA探針-蛋白質復合物，最后通過Western Blot或質譜(MS)鑒定蛋白質類型。多用于特定基因的轉錄因子研究。

DNA pull down原理圖

Chip原理

染色質免疫沉淀(ChIP)是研究體內蛋白質與DNA相互作用的理想技術，是目前研究轉錄因子與啟動子區域間相互聯系的較好方法。

在活細胞狀態下使細胞內的蛋白質和DNA交聯，并用超聲波將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小片段。選擇與目的蛋白特異性結合的抗體免疫沉淀DNA-蛋白質復合體，從而特異性地富集與目的蛋白結合的染色體片段。該DNA可用于后續的定量PCR檢測(qPCR)或高通量測序(seq)。常用于驗證或尋找與已知蛋白結合的DNA序列。

Chip原理圖

RNA pull down

RNA pull-down是研究細胞內RNA與蛋白/RNA結合情況的技術。

先將RNA進行標記（如生物素標記），再與細胞裂解液共同孵育，從而形成RNA-RNA/蛋白質復合物，進而檢測與之結合的RNA或蛋白質。復合物洗脫后，通過熒光定量PCR(RNA pull down-QPCR)或高通量測序(RNA pull down-seq)方法來鑒定目標RNN是否與某些RNA分子相互作用，通過Western blot(pull down-WB)實驗和質譜(pull down--MS)技術檢測目標RNA是否與某些蛋白相互作用。

RNA pull down原理

RIP原理

RIP技術(RNA Binding Protein lmmunoprecipitation, RNA結合蛋白免疫沉淀)，是研究細胞內RNA與蛋白結合情況的技術，是了解轉錄后調控網絡動態過程的有力工具。

該技術主要是運用目標蛋白的特異性抗體把相應的RNA-蛋白復合物沉淀下來，然后經過分離純化對結合在復合物上的RNA進行q-PCR驗證或高通量測序分析。

RIP原理圖

GST Pull-Down試劑盒

GST Pull-Down實驗是驗證體外蛋白互作的主要方式。通過體外表達親和蛋白-GST，將親和蛋白固化在谷胱甘肽親和樹脂上充當“誘餌蛋白"，將細胞或者組織的總蛋白和此“誘導蛋白"混合孵育后可從中捕獲“目標蛋白"，最后通過洗脫的方式將“目標蛋白"洗脫后檢測，就可以分析蛋白和蛋白互作關系。

GST Pull-Down原理圖

CoIP原理

免疫(共)沉淀(IP/CoIP)是基于抗體和蛋白的特異性親和作用，通過捕獲與蛋白或抗原特異性結合的抗體，進而從復雜的樣品中捕獲及富集目標蛋白，同時可以測定與之相互作用的蛋白或其它生物大分子。

CoIP原理圖

當無法進行體內互作檢測或無法獲得在體樣本或者在體樣本沒有特異性一抗可以使用但是又必須進一步驗證蛋白互作結論時，可用到GST pull down實驗；

總結

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