透析胎牛血清在這些研究領域“大顯身手”

胎牛血清是細胞培養界的“香餑餑"，備受胞胞們的“寵愛"，其實還有一個“香煎餅"，大家可知道？對一些細胞的特殊實驗研究，透析胎牛血清可謂是散發著一股“煎餅的清香"。

透析胎牛血清(abs945)

透析法處理血清是去除了分子質量小于10kDa的小分子，避免外源小分子對細胞產生干擾。10kDa以下的小分子有化學小分子、核苷酸、某些激素、鹽、低分子量蛋白質、氨基酸、細胞因子、葡萄糖、殘留抗生素和其他外源分子等。適合脈沖示蹤實驗（例如同位素標記特定小分子，并加入到培養體系中，以研究細胞代謝），也適合轉染CHO后的篩選等應用。是研究蛋白質組學、同位素標記、細胞信號傳導和報告基因分析、報告基因細胞系篩選的很好工具，接下來我們了解一下具體應用。

1、小分子標記實驗

該實驗是將用同位素標記的小分子如核苷酸摻入到培養基中培養細胞，來標記細胞內新合成的DNA，一般培養一段時間，細胞中的DNA將都被同位素標記，然后進行DNA提取，純化等實驗分析。為避免胎牛血清中天然核苷酸的干擾，這時就需要用到透析胎牛血清，以保證摻入細胞DNA中的核苷酸均為標記核苷酸。

小分子標記實驗示例

2、陽性轉染細胞克隆的篩選

一些有基因缺陷的細胞株如CHO-DFGRˉ，缺乏二氫葉酸還原酶(DHFR)，必須在添加了次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的培養液中才能存活。可將我們想要表達的目的基因和DHFR基因構建質粒，然后轉染細胞，用不含上述添加劑的培養基進行培養。未轉入重組質粒的缺陷細胞會凋亡；成功轉入重組質粒的細胞會存活下來，形成細胞克隆。為避免胎牛血清中次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的干擾，這時就需要用到透析胎牛血清，以保證wan全培養液中不含次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸。

陽性轉染細胞克隆的篩選示例

3、細胞平臺藥物篩選

細胞水平藥物篩選是更接近生理條件的一種藥物篩選模型，其模型是擬設計藥物作用的靶細胞，應用細胞培養技術獲取所需細胞，將這些細胞與候選化合物相互作用，通過與生化水平篩選類似的檢測技術測定化合物的作用能力，從而對化合物進行篩選。在藥物篩選過程中，未避免外源性的小分子對實驗的干擾，就需要用到透析胎牛血清。

細胞平臺藥物篩選示例

本期講解就到這里了，如有細胞培養問題，歡迎一起交流。

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