多重熒光免疫組化 | T細胞分型

在免疫組化研究中，通過使用針對這些標志物的特異性抗體，可以對T細胞的不同亞群進行鑒定和分析。這有助于研究T細胞在免疫反應中的作用，特別是在腫瘤免疫微環境中的功能。接下來就和小愛一起來了解一下T細胞的分型~

一、T細胞背景介紹

T細胞是一群起源于骨髓，成熟于胸腺，在外周免疫器官組織活化，在血液、淋巴循環，在病變部位發揮效應的異質性細胞。

T細胞不產生抗體，而是直接通過抗原特異性受體識別病原體。 T細胞在胸腺中分化并作為CD4+輔助T細胞或CD8+細胞毒性T細胞協調免疫反應。

T細胞主要從兩方面為免疫反應做出貢獻：一些細胞負責直接殺死感染或癌變的細胞。另一些細胞負責指導和調節免疫反應進程，如輔助或抑制B細胞產生抗體，對特異性抗原和促有絲分裂原的應答反應以及產生細胞因子等。根據T細胞在分化和發育的過程中所表達的特征性分子，可以對T細胞進行最常見的簡單分類。

按TCR類型：αβT細胞、γδT細胞；

按共刺激分子：CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞；

按功能：Th細胞、Tc細胞、Treg細胞；

按活化階段：初始(naive)T細胞、效應(effector)T細胞、記憶性(memory)T細胞。

二、T細胞的活化

研究表明，誘導T細胞的活化與增殖需要兩種信號：一種是TCR/CD3與抗原提呈細胞(APCs)表面特異的MHCⅡ抗原肽復合物結合產生的特異性抗原刺激信號；另一種是非特異性協同刺激信號，由APCs 表面的協同刺激分子和T細胞的相應受體相互作用后產生，其中CD28/B7是最為重要的協同刺激分子，能增加IL-2的產生，加速T細胞增殖，阻止細胞進入無反應狀態或死亡。

T細胞活化的第一信號：APC將pMHC提呈給T細胞，TCR特異性識別結合在MHC分子槽中的抗原肽，導致CD3與共受體（CD4或CD8）的胞漿段相互作用，使得T細胞初步活化。這是T細胞活化的第一信號（抗原刺激信號），同時與T細胞接觸的APC也被活化，并上調共刺激分子等活化相關分子的表達。

T細胞活化的第二信號：T細胞與APC細胞表面多對共刺激分子相互作用產生T細胞活化所需的第二信號（共刺激信號），導致T細胞全部活化。活化T細胞誘導性表達一系列細胞因子和細胞因子受體，而活化的APC也產生多種細胞因子，這些均為T細胞增殖和分化奠定基礎。如缺乏共刺激信號，第一信號非但不能有效激活特異性T細胞，反而導致T細胞失能。

細胞因子促進細胞的增殖和分化：T細胞全部活化后，多種細胞因子的刺激作用才能進一步增殖和分化。其中IL-1和IL-2對T細胞增殖至關重要；其他細胞因子參與T細胞的分化。如果沒有細胞因子，活化T細胞不能增殖和分化，導致T細胞活化后凋亡。

三、T細胞上的受體因子

T細胞上有很多受體因子共同參與T細胞的發育、激活、增殖、分化和效應功能，是T細胞發揮免疫應答作用的基礎。了解這些受體的生物學特性和功能對于研究T細胞的免疫機制和開發免疫相關治療策略具有重要意義。

殺傷性T細胞（細胞毒性T淋巴細胞：CD8+），這種細胞可識別抗原，抗原由與宿主細胞結合的致病原釋放。殺傷性T細胞能夠識別不同的細胞類型和病原體并與其發生相互作用。T細胞受體結合外來抗原，觸發細胞毒素釋放進入受感染的細胞，導致細胞死亡；

輔助T細胞（Th細胞：CD4+），可促進免疫系統對抗感染。Th細胞識別并結合致病抗原，導致可溶性因子（細胞因子）的釋放，進而將信號傳導至免疫系統的其余部分以啟動應答。Th細胞分為不同的亞型，包括Th1細胞和Th2細胞。Th1細胞可結合具有吞噬功能的巨噬細胞和樹突細胞。Th2細胞結合和激活B細胞，這是產生抗體的必要過程，從而保證對特定細菌或病毒感染的終生免疫力；

調節性T細胞（Treg細胞：CD4+、CD25+、Foxp3+、CD127+），可保持免疫系統功能正常。一旦發生了免疫反應，這類細胞可確保反應得到終止。這種調節機制抑制了免疫活性，從而防止過度免疫反應。正常運作的Treg細胞對預防自身免疫病至關重要。

T細胞受體(TCR)：T細胞受體是T細胞特異性識別抗原的主要分子，由α和β或γ和δ鏈組成，形成TCRαβ或TCRγδ；

主要組織相容性復合體(MHC)分子： T細胞通過TCR識別由MHC分子呈遞的抗原肽段。CD4+T細胞識別MHC II類分子，而CD8+T細胞識別MHC I類分子；

CD3復合物：CD3是T細胞表面的一個重要標志物，與TCR共同組成TCR-CD3復合物，參與T細胞的激活；

共刺激分子：如CD28、CTLA-4、ICOS等，它們與APC（抗原遞呈細胞）表面的B7家族分子(CD80/CD86)相互作用，提供T細胞激活的第二信號；

CD4和CD8：CD4和CD8是T細胞表面輔助受體，分別與MHC II類和MHC I類分子結合，增強T細胞對抗原的識別；

細胞因子受體：T細胞表面表達多種細胞因子受體，如IL-2R、IL-7R、IL-12R等，這些受體與其配體結合后，調節T細胞的存活、增殖和分化；

檢查點分子：如PD-1、CTLA-4、TIM-3等，這些分子參與調節T細胞的激活和抑制，維持免疫反應的平衡；

細胞黏附分子：如CD2、LFA-1(CD11a/CD18)、CD58等，它們參與T細胞與APC之間的黏附，促進免疫突觸的形成；

趨化因子受體：如CCR7、CXCR3等，它們指導T細胞遷移至炎癥部位或淋巴組織；

轉錄因子： 如T-bet、GATA3、RORγt、FoxP3等，它們在T細胞分化為特定亞群時起關鍵調控作用。

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