探秘黑膠蟲（上）

黑膠蟲污染是一個(gè)老生常談的話題。目前，科研界對(duì)黑膠蟲的污染特征沒(méi)有統(tǒng)一的判定標(biāo)準(zhǔn)，通常污染特征總結(jié)有：

1）活躍游動(dòng)或旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)或原地顫動(dòng)（如視頻1、2、3所示）；

視頻1 活躍游動(dòng)


視頻2 旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)


視頻3 原地顫動(dòng)

2）呈桿狀、球狀、卵圓狀；

3）培養(yǎng)基不渾濁；

4）復(fù)蘇或傳代時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)黑膠蟲污染，并且與細(xì)胞呈現(xiàn)此消彼長(zhǎng)的現(xiàn)象。

我們對(duì)多個(gè)黑膠蟲樣本進(jìn)行測(cè)序鑒定，這里舉兩個(gè)典型鑒定結(jié)果給大家分享：

圖1 Sphingomonas（鞘氨醇單胞菌）單個(gè)及菌落圖

圖2 Brevundimonas vesicularis（泡囊假單胞菌）單個(gè)及菌落圖

這些黑膠蟲樣本被鑒定為細(xì)菌。另外我們也查閱了大批文獻(xiàn)，十幾年前就有人做了相關(guān)研究，很多都鑒定為細(xì)菌，例如以下這篇^[1]：

圖3 客戶文獻(xiàn)截圖

這篇文章講述的是，首先從黑膠蟲污染細(xì)胞樣本中分離得到黑膠蟲，然后從黑膠蟲中提取基因組DNA進(jìn)行基因測(cè)序及分析，鑒定出的黑膠蟲為無(wú)色桿菌屬(Achromobacter)。

細(xì)菌已經(jīng)在地球上存在三十多萬(wàn)年了，具有不同的形狀，根據(jù)形狀主要分為三類，即：球菌、桿菌和螺旋菌（包括弧菌、螺菌、螺桿菌）（圖4）。鞭毛是著生在細(xì)菌表面的絲狀運(yùn)動(dòng)器官。由于鞭毛很細(xì)，只有用特殊的染色法，才能用光學(xué)顯微鏡觀察到。直徑12～25nm，長(zhǎng)3～12μm，柔軟、波形（圖5）。

圖4 細(xì)菌模式圖和細(xì)菌形狀分類

圖5 細(xì)菌鞭毛分布圖

單生（一根鞭毛著生于一端） 雙生（兩根鞭毛分別著生于兩端） 單叢生（一叢鞭毛著生于一端） 雙叢生（兩叢鞭毛分別著生于兩端） 周生（多根鞭毛遍布于菌體上）

鞭毛有三種運(yùn)動(dòng)方式：在液體中泳動(dòng)，在固體表面上滑行，在液體中旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)。所以難怪，我們看到的黑膠蟲不是在液體中活躍游動(dòng)，就是在液體中旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)，這就和黑膠蟲被鑒定為細(xì)菌的結(jié)果相吻合了。

黑膠蟲污染頑固，如何消殺，胞胞巴適有秘方——黑膠蟲清除劑，其所含有的多肽活性成分，相比傳統(tǒng)抗生素有效清除黑膠蟲；清除周期短，視黑膠蟲污染程度通常3-6天可有效去除；廣譜性強(qiáng)，可有效清除常見(jiàn)支原體污染。

本期講解就到這了，請(qǐng)持續(xù)關(guān)注愛(ài)必信公眾號(hào)，等待探秘黑膠蟲（下）。

[1] Jennifer Sue Gray, Janette Marie Birmingham, Jenifer Imig Fenton. Got black swimming dots in your cell culture? Identification of Achromobacter as a novel cell culture contaminant[J]. Biologicals, 2010, 38(2):273-7.

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表1 細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品推薦