SH-SY5Y細胞培養攻略

人神經母細胞瘤細胞（SH-SY5Y） 是于1970年建自骨瘤轉移灶的神經母細胞瘤 SK-N-SH細胞系經3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細胞的密度可高達106 cells/cm2，具有中等水平的多巴胺β羥化酶的活性。基本形態上皮樣，多數貼壁，少數懸浮； 營養體系：推薦DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S（abs9244）。

表1 SH-SY5Y細胞基本信息

圖1 SH-SY5Y（人神經母細胞瘤細胞）

首先，我們討論的是SY5Y五天傳一代算不算正常？SH-SY5Y 增殖緩慢，再加上喜歡聚團生長，鏡下觀察融合率不高，但細胞簇實際密度大，需要5-7天才能達到80%以上的融合率，所以5-7天傳一代很正常（如圖2所示，融合率約為70%的SY5Y）。如果細胞培養達到一周都無法傳代，建議把細胞消化下來，接種到更小的孔板中，增加細胞密度，促進細胞生長。

接下來我們討論第二個話題SY5Y懸浮細胞過多正不正常？SY5Y的生長特點為大部分貼壁，呈上皮樣，有短觸角延伸出來，傾向于成簇生長，容易成團；少部分懸浮，圓潤有光澤。 如果SY5Y出現大量懸浮是不正常現象。如圖3所示，懸浮細胞居多的SY5Y。

圖2 懸浮細胞居多的SY5Y

如何解決這種情況呢？如果貼壁細胞生長狀態良好、密度適中，可以舍棄懸浮細胞；如果貼壁細胞很少，用胰酶消化并離心，將細胞用新鮮的完培重懸并接種到培養瓶，隔段時間觀察細胞是否貼壁。

最后我們討論一下不同營養體系培養的SY5Y形態差異大不大。我們對比了兩種營養體系培養的SY5Y細胞形態。體系一是DMEM+20%FBS-熱滅活，體系2是DMEM-F12 + 10%FBS（如圖4所示）。在培養的第2天和第5天進行了相應的形態比較。傳代第2天，低密度下，兩種營養體系培養的SY5Y形態沒有明顯區別，均為少數懸浮，多數呈上皮樣，有短觸角延伸出來，傾向于聚團生長；傳代第5天，體系2培養的SY5Y團塊話過于嚴重，細胞黏在一起，細胞輪廓難以分辨清楚，體系1細胞有略微聚團（SY5Y本身有聚團生長特性），細胞形態正常。體系1更適合細胞增殖。

圖3 兩種營養體系培養的SY5Y形態對比圖（兩種營養體系所用血清批號一致）

本期講解就到這里了，下一期您想了解哪種細胞的培養攻略呢？歡迎留言評論哦。如有細胞培養問題，歡迎掃碼加我微信哦。

Absin（優寧維-愛必信）-小武

細胞形態異常，"望、聞、問、切"，我給您的細胞"把把脈"

注：圖源網絡和客戶，僅供參考學習用

本期小愛推薦

?培養簡單     ?擴增效率高     ?維持穩定傳代

貨號	品名	規格
abs977	胎牛血清（特級）	500ml
abs972	胎牛血清（優級）	500ml
abs974	胎牛血清（標準級）	500ml
abs9483	高糖DMEM培養基	500ml
abs9484	RPMI-1640培養基	500ml
abs9505	MEM培養基	500ml
abs9506	α-MEM培養基	500ml
abs9554	Ham's F-12	500ml
abs9561	DMEM/F-12培養基	500ml
abs962	PBS緩沖液	500ml
abs970	D-PBS緩沖液（1×，無鈣鎂）	500ml
abs971	D-PBS緩沖液（含 Ca2+ Mg2+）	500ml
abs9257	Hanks平衡鹽溶液（不含Ca2+ Mg2+,無酚紅）	500ml
abs9258	Hanks平衡鹽溶液（含Ca2+ Mg2+,無酚紅）	500ml
abs47014938	胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%），含酚紅	100ml
abs47047375	胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%），不含酚紅	100mL
abs9479	無DMSO無血清細胞凍存液	100mL
abs9417	無血清細胞凍存液	100mL
abs9473	細胞凍存液（含血清）	100mL
abs9474	組織保存液	100ml
abs9480	組織凍存試劑盒	30ml
abs9486	模具	1個/套
abs9487	小刀	5片/包
abs9481	組織復蘇試劑盒	50ml
abs42020125	卡那霉素B硫酸鹽	250mg
abs42018967	硫酸慶大霉素溶液	10ml
abs9244	青鏈雙抗	100ml
abs9245	青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液	100ml
abs44071148	制霉菌素	1g
abs9252	支原體檢測試劑盒	100T
abs9375	支原體清除試劑	200uL×5
abs9376	支原體預防	500uL×4
abs816578	環丙沙星鹽酸鹽	500mg
abs9374	水盤抑菌劑	20ml
abs9371	水浴鍋抑菌劑	100ml
abs9372	培養箱除菌劑	480ml
abs9373	細胞房除菌劑	480ml

 

Absin特色產品線：
WB相關：ECL發光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...