mIHC多色技術在晚期甲狀腺癌免疫圖譜分析中的應用

本文通過mIHC多重熒光免疫技術和多光譜成像技術(MSI)分析了不同類型晚期甲狀腺癌的免疫圖譜，通過挖掘腫瘤微環境中的寶貴信息，幫助我們去選擇免疫治療的候選者。 
研究者針對收集的12例伴有遠端轉移的DTC患者和16例ATC患者的28份組織樣本，使用mIHC和MSI評估分析細胞表面因子CD 4、CD8、PD-1、PD-L1、Foxp3和細胞角蛋白CK（圖1A），再結合腫瘤比例評分法（TPS）和聯合陽性評分法(CPS)評估關鍵因子PD-L1的表達。 

圖1.特征性細胞表面標志物的多光譜圖像和表達情況 
（A）代表性晚期甲狀腺癌共定位結果；
（B）CD4, CD8, PD-1, PD-L1, Foxp3和CK不同顏色單染以排除交叉反應； 
（C）PD-L1在不同樣本中的表達情況，驗證mIHC與常規方法的一致性 
 

結果（圖2）顯示甲狀腺未分化癌ATC組中PD-L1陽性的腫瘤細胞顯著多于分化型甲狀腺癌DTC組（每平方毫米183.5 vs. 0.03, P < 0.001）。

圖2. 基于病理亞型的表達PD-L1的腫瘤細胞數量比較

與DTC組相比，ATC組中淋巴細胞浸潤顯著增加（1,138 [67.15–2,731] vs. 84.05 [0–300.9], p < 0.05），并且ATC中PD-L1或PD-1陽性淋巴細胞顯著多于DTC（圖3A）。圖3B和圖3C則分別表明ATC組中細胞毒性T淋巴細胞（370.7 [38.19–2,327] vs. 18.97 [0.99–169.1] , p < 0.05）和Tregs（263.8 [26.9–1,499] vs. 14.15 [0.34–188.0], p < 0.05）均顯著多于DTC組。

圖3. DTC和ATC組中T淋巴細胞及其亞型的數量比較
 

此外，研究者進一步結合腫瘤比例評分法（TPS）和聯合陽性評分法(CPS)評估了關鍵因子PD-L1在不同類型甲狀腺癌樣本中的表達。TPS和CPS的具體定義如下，PD-L1陽性和高表達的臨界值在TPS和CPS中分別為1和50，以及1和20。

結果顯示，在所有DTC樣本中PD-L1表達的TPS和CPS結果均為陰性，而在ATC樣本中陽性占比則分別高達81%和94%（圖4），并且PD-L1高表達的比例分別有6%和44%。

本文研究人員主要通過mIHC多色方法評估分析了不同晚期甲狀腺癌的免疫圖譜，聚焦PD-L1表達及淋巴細胞浸潤情況。研究發現相較于伴有遠端轉移的分化型甲狀腺癌DTC組，甲狀腺未分化癌ATC組PD-L1陽性更高，并且具有更多PD-1/PD-L1陽性的浸潤性淋巴細胞。文章揭示了靶向PD-L1的免疫治療可能是一種針對甲狀腺未分化癌ATC的有效治療策略。

愛必信生物提供專業的mIHC多重熒光免疫組化試劑盒產品，并支持委托服務，包含預實驗單染驗證、染色、拍照及分析全過程，如上訴文獻所涉及的多光譜成像及定量數據分析等內容，我司服務均可覆蓋！ 


【愛必信mIHC服務】

* 我們可以提供的服務：
Absin多重熒光免疫組化服務提供預實驗驗證-染色-拍照-分析全過程。 
最多六指標七色（含DAPI）的多色免疫組化服務（芯片最多四指標五色），樣本涵蓋石蠟切片、冰凍切片及組織芯片（TMA），組織大片請提供單塊組織切片，FFPE樣本，厚度3-5um。正式實驗最好每例2張，1張備用。預實驗樣本數量根據預實驗方案定。

(* 所有抗體指標需要您提供)

* 我們可以提供的服務結果：

1.五色及以下提供全片200X（相當于物鏡20X，目鏡10X）原圖，六七色提供視野200X圖片，選定視野一般默認3視野，超過視野單獨收費，收費標準根據具體情況訂，提供看圖軟件可在客戶端打開。數據上傳網盤1G以內，或用U盤寄送1G以上。
2.客戶區域的單細胞分析結果：

• 單陽性細胞占有核細胞百分比，密度。
• 雙陽性細胞占有核細胞百分比，密度。
• 組織面積和特定病理形態面積計算。
• TMA提供每個芯點的以上定量結果。

Absin多色試劑盒（abs50032） 

組分信息： SuperNova系列染料（可選）、信號放大反應液、鼠兔通用型或者抗兔抗鼠HRP標記二抗、抗熒光淬滅封片劑、DAPI 
產品特點： 可快速完成最高六指標七色的熒光多標記； 染料經過優化處理，相比普通染料，強度更高，持續時間更長； 有組化經驗即可操作，染色無需特殊儀器，提供詳細的protocol