支原體是一種大小僅為0.2~0.3 um,無細胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在細胞培養過程中,支原體感染發生率達到63%,是細胞培養中令人頭疼的大問題。支原體污染可能來自培養基、血清或實驗操作者,會影響細胞生長率、細胞形態、基因表達、細胞代謝和細胞活力。支原體感染不易察覺,因此對培養細胞定期進行支原體檢測就非常重要。
那如何確定細胞是被支原體污染呢?
1、細胞形態改變
支原體污染比較嚴重時可出現生長減慢,有的培養基pH明顯變酸,并出現細胞病變,以此可依次對支原體污染進行檢測,但有些情況下支原體污染引起的病變特征與病毒感染相似,因此不能準確診斷。
2. 試劑盒檢測法:
愛必信支原體染色檢測試劑盒可用于在培養細胞中對支原體或其它原核生物進行原位染色檢測。主要用于檢測培養細胞中是否存在支原體污染。
培養細胞中的細菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學顯微鏡下可見,但支原體污染在光學顯微鏡下不可見,必須通過特定的檢測方法進行檢測。
檢測支原體污染的方法有很多種,包括支原體分離培養、支原體特異酶檢測、RT-PCR檢測以及DNA熒光染色檢測。該試劑盒是通過Hoechst染色來檢測支原體,可快速、有效、高靈敏度地檢測支原體污染。
如果發現有支原體污染,建議更換無污染的細胞進行培養。該試劑盒如用于六孔板樣品檢測,至少可以檢測100個樣品。
3 細胞間隙存在不動小黑點
如何預防支原體感染?
定期檢測:支原體感染會使培養細胞慢慢枯萎,因此對培養細胞定期進行支原體檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應該進行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規化堅持下去,是細胞培養實驗室應對支原體感染的關鍵。使用愛必信支原體預防劑,可以有效的排除血清、培養基中可能存在的支原體,非抗生素類:多肽類,無耐藥性,無二次污染:隨著培養時間的延長,會被緩慢降解為氨基酸,可用于大規模發酵、細胞治療等領域,且細胞毒性小,已在多種細胞上進行過驗證。可以放心使用
如發現細胞已經感染,如何清除支原體感染?
使用愛必信支原體清除試劑可以有效抑制和清除在培養細胞中廣泛存在的支原體污染。一方面可以用于消除細胞中已有的支原體污染,也可以用于防止支原體污染。 本試劑是一種篩選獲得的天然抗生素,抑制或清除支原體時的濃度比較低,對細胞沒有毒性。和細胞培養時所常用的青霉素和鏈霉素那樣,對細胞的各種檢測沒有干擾。可以有效抑制并清除實驗室常見支原體,包括 Mycoplasma orale, M. arginini, M. hyorhinis和Acholeplasma laidlawii。通常在細胞培養液中加入本試劑約一周即可有效抑制或清除支原體。
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名稱 | 貨號 | 規格 |
支原體染色檢測試劑盒 | abs9252 | 100T |
支原體清除劑 | abs9375 | 200ul; 200uL×5 |
支原體預防劑 | abs9376 | 500ul; 500uL×4 |
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